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光反應(yīng)活性氨基酸交聯(lián)和甲醛交聯(lián)用于蛋白相互作用分析互補(bǔ)
文章來(lái)源 : 齊岳生物
作者:zhn
發(fā)布時(shí)間 : 2022-08-23 12:41:44
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產(chǎn)品名稱:光反應(yīng)活性氨基酸交聯(lián)和甲醛交聯(lián)用于蛋白相互作用分析互補(bǔ)
產(chǎn)品描述:
光反應(yīng)活性氨基酸交聯(lián)和甲醛交聯(lián)用于蛋白相互作用分析互補(bǔ) ? L-光反應(yīng)-亮氨酸(L-Photo-Leucine)和L-光反應(yīng)-甲硫氨酸(L-Photo-Methionine)是L-亮氨酸和L-甲硫氨酸氨基酸的類似物,具有可被活化的雙吖丙啶側(cè)鏈,當(dāng)暴露于紫外光照射時(shí)能夠與鄰近的分子進(jìn)行化學(xué)交聯(lián)。與它們存在的對(duì)應(yīng)物一樣,這些光反應(yīng)活性氨基酸在蛋白合成時(shí)可以被內(nèi)源性地整合到蛋白的一級(jí)序列中。這些合成的蛋白,其在環(huán)境中參與蛋白-蛋白相互作用結(jié)構(gòu)域可以通過(guò)雙吖丙啶基團(tuán)進(jìn)行共價(jià)交聯(lián)。傳統(tǒng)的交聯(lián)實(shí)驗(yàn)需要加入雙功能性化學(xué)交聯(lián)劑以及相關(guān)的試劑溶劑,它們對(duì)所要研究的細(xì)胞生物學(xué)內(nèi)容有不良影響。使用光反應(yīng)活性氨基酸可將這些潛在的不良影響小化,使所要研究和鑒別的細(xì)胞中的穩(wěn)定的及短暫的蛋白相互作用高度可信。當(dāng)與不含亮氨酸和甲硫氨酸的配制的型細(xì)胞培養(yǎng)基聯(lián)合使用時(shí),蛋白合成機(jī)制會(huì)將光反應(yīng)活性衍生物像其存在的氨基酸進(jìn)行同樣處理。因此,它們可以在蛋白一級(jí)序列中取代亮氨酸或甲硫氨酸。當(dāng)暴露于紫外光(見(jiàn)紫外燈,下頁(yè))時(shí),雙吖丙啶環(huán)形成有活性的反應(yīng)中間體,與鄰近蛋白的側(cè)鏈和骨架形成共價(jià)鍵。關(guān)聯(lián)結(jié)合的配體便立即被捕獲。交聯(lián)的蛋白復(fù)合體通過(guò)在SDS–PAGE 中遷移率降低而被檢測(cè),隨后進(jìn)行Western blot 檢測(cè),分子排阻色譜,蔗糖密度梯度沉降或質(zhì)譜檢測(cè)。 ? 光反應(yīng)活性氨基酸交聯(lián)和甲醛交聯(lián)是用于蛋白相互作用分析的互補(bǔ)。Hela細(xì)胞進(jìn)行模擬處理(1道),使用1%甲醛處理10 分鐘(2道),或使用光-甲硫氨酸和光-亮氨酸處理后進(jìn)行紫外線處理(3道)。細(xì)胞裂解后每個(gè)樣品取10μg 進(jìn)行SDS-PAGE和Western blotting分析,使用抗hsp90,STAT3,Ku70 和Ku86抗體。以β-actin和GAPDH印跡作為上樣對(duì)照。 ? 相關(guān)產(chǎn)品供應(yīng)列表: 縮寫(xiě)名稱 cas號(hào) 中文名稱 ANB-NOS交聯(lián)劑 60117-35-3 N-5-疊氮基-2-硝基苯甲酰氧基琥珀酰亞胺 BMPS交聯(lián)劑 55750-62-4 N-(?-馬來(lái)酰亞胺丙氧基)琥珀酰亞胺酯 EMCS交聯(lián)劑 55750-63-5 N- [e-馬來(lái)酰亞胺基己酰氧基]琥珀酰亞胺酯 GMBS交聯(lián)劑 80307-12-6 N- [γ-馬來(lái)酰亞胺丁酰氧基]琥珀酰亞胺 LC-SPDP交聯(lián)劑 ? 琥珀酰亞胺基6-(3- [2-吡啶基二硫代]-丙酰胺基)己酸酯 MBS交聯(lián)劑 58626-38-3 間馬來(lái)酰亞胺基苯甲?;?N-羥基琥珀酰亞胺酯 PDPH交聯(lián)劑 ? 3- [2-吡啶基二硫代]丙酰肼 SBA交聯(lián)劑 42014-51-7 N-琥珀酰亞胺基溴乙酸酯 SIA交聯(lián)劑 39028-27-8 N-琥珀酰亞胺dian乙酸酯; NHS-dian乙酸酯 Sulfo-SIA交聯(lián)劑 ? N-磺基琥珀酰亞胺dian代乙酸鹽 SMCC交聯(lián)劑 64987-85-5 琥珀酰亞胺基-4- [N-馬來(lái)酰亞胺基甲基]環(huán)己烷-1-羧酸酯 SMPB交聯(lián)劑 79886-55-8 N-琥珀酰亞胺基4- [4-馬來(lái)酰亞胺基苯基]丁酸酯 SMPH交聯(lián)劑 367927-39-7 琥珀酰亞胺-6- [?-馬來(lái)酰亞胺基丙酰胺基]己酸酯 SPDP交聯(lián)劑 68181-17-9 N-琥珀酰亞胺基3- [2-吡啶基二硫代]-丙酸酯 Sulfo-LC-SPDP交聯(lián)劑 ? 磺基琥珀酰亞胺基6-(3'-[2-吡啶基二硫代]-丙酰胺基)己酸酯 Sulfo-MBS交聯(lián)劑 92921-25-0 間馬來(lái)酰亞胺基苯甲?;?N-羥基磺基琥珀酰亞胺酯 Sulfo-SANPAH交聯(lián)劑 102568-43-4 N-磺基琥珀酰亞胺-6- [4'-疊氮基-2'-硝基苯基氨基]己酸酯 Sulfo-SMCC交聯(lián)劑 92921-24-9 磺基琥珀酰亞胺基-4- [N-馬來(lái)酰亞胺基甲基]環(huán)己烷-1-甲酸 上述產(chǎn)品用于科研,不可用于人體實(shí)驗(yàn)! 小編:wyf ?2020.10.29 相關(guān)目錄: 透明質(zhì)酸鈉(Hyaluronate)的活性修飾 共價(jià)連接相互作用蛋白聯(lián)系我們:
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